PCR（聚合酶链式反应）是一种用于扩增特定DNA片段的分子生物学技术。该技术通常用于复制DNA样品中所需的目标DNA。PCR的基本原理类似于DNA的自然复制过程，其特异性取决于与目标序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火和延伸三个基本反应步骤组成：
1. 模板DNA的变性：通过加热模板DNA至约93℃一段时间，使其双链DNA解离为单链，以便与引物结合。
2. 模板DNA与引物的退火：在55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。
3. 引物的延伸：在TaqDNA聚合酶的作用下，利用dNTP作为反应原料，根据碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。
通过循环变性、退火和延伸这三个步骤，可以获得更多的“半保留复制链”。PCR的特点包括特异性强、灵敏度高、简便快速。在设计PCR引物时，需要确定要扩增的DNA区域，并设计一对位于目标区域的引物，一个位于正向链，另一个位于反向链。引物必须具有特异性，防止扩增出非特异性片段。同时，正向引物和反向引物应具有相似的退火温度，GC含量与退火温度相关，可以通过调整引物长度来改变退火温度。此外，需要避免引物序列出现二级结构或引物二聚体，因为这会降低PCR效率。